THÔNG TIN VỀ LUẬN ÁN ĐƯA LÊN MẠNG
Tên đề tài luận án: Nghiên cứu tái sinh in vitro và tạo cây ca cao (Theobroma cacao L.) chuyển gen
Chuyên ngành: Di truyền học Mã số: 62 42 01 21
Họ và tên Nghiên cứu sinh: Hà Hồng Hạnh
Họ và tên cán bộ hướng dẫn: TS. Lê Thị Thu Hiền, PGS.TS. Nông Văn Hải
Cơ sở đào tạo: Viện Công nghệ sinh học, Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam
TÓM TẮT NHỮNG KẾT LUẬN MỚI CỦA LUẬN ÁN
1. Nghiên cứu đã tiến hành khảo sát, đánh giá khả năng hình thành mô sẹo, phôi soma sơ cấp, thứ cấp, khả năng tạo chồi, ra rễ và phát triển thành cây của phôi soma từ nguồn vật liệu là nhị lép, cánh hoa của 9 dòng ca cao thương mại ở Việt Nam. Kết quả cho thấy, mô sẹo của các dòng ca cao TD1, TD3, TD5, TD7, TD8 và TD9 có khả năng hình thành phôi soma sơ cấp với tỷ lệ dao động từ 2,6 – 44,0%. Trong đó, dòng TD8 có tỷ lệ tạo phôi soma cao nhất (44,0%). Phôi soma thứ cấp thu được từ trục mầm và lá mầm của 5 dòng TD1, TD3, TD5, TD7, TD8 với tỷ lệ dao động từ 5,0 – 48,5%. Các phôi soma của các dòng TD1, TD3, TD5, TD7, TD8, TD9 đều có khả năng nảy mầm thành cây hoàn chỉnh và phát triển bình thường ở nhà lưới.
2. Gen mã hóa chitinase (TcChi1) đã được phân lập thành công từ hệ gen của cây ca cao dòng TD3 và được đăng ký trên Ngân hàng gen Quốc tế với mã số KF268030. Vector biểu hiện trong thực vật pCB301 mang gen TcChi1 đã được đánh giá hoạt động trên cây thuốc lá mô hình.
3. Quy trình chuyển gen sử dụng vi khuẩn A. tumefaciens chủng EHA105 vào phôi soma của dòng ca cao TD8 đã được chuẩn hóa thông qua gen chỉ thị gus/gusplus và tạo được 3 dòng ca cao mang gen chỉ thị gusplus. Hiệu quả chuyển gen dao động từ 0 – 1,4% dựa vào kết quả PCR dương tính của các cây tái sinh vượt qua giai đoạn chọn lọc.
4. Gen mã hóa chitinase TcChi1 đã được chuyển thành công vào dòng ca cao TD8 thông qua A. tumefaciens và thu được 2 dòng ca cao TD8 mang gen TcChi1 ở thế hệ T0 là TD8/pCB/TcChi1/2 và TD8/pCB/TcChi1/3 với hiệu quả chuyển gen cao nhất là 0,57%. Khả năng gắn kết ổn định của gen TcChi1 trong các cây ca cao chuyển gen đã được khẳng định bằng kết quả lai Southern.
